Μια νέα τεχνική που χρησιμοποιείται για τη διάγνωση του συνδρόμου Down
Το FISH σημαίνει φθορίζουσα in situ υβριδοποίηση. Ο έλεγχος FISH ή η ανάλυση FISH, όπως αναφέρεται μερικές φορές, είναι μια σχετικά νέα κυτταρογενετική τεχνική που επιτρέπει σε έναν κυτταρογενετικό να προσδιορίσει πόσες αντιγραφές ενός συγκεκριμένου χρωμοσώματος είναι παρούσες χωρίς να χρειάζεται να περάσουν όλα τα στάδια που σχετίζονται με την παραγωγή ενός καρυότυπου . Για παράδειγμα, η ανάλυση FISH μπορεί να σας πει γρήγορα πόσα χρωμοσώματα αριθμού 21 υπάρχουν, αλλά δεν μπορεί να σας πει τίποτα για τη δομή αυτών των χρωμοσωμάτων.
Πως δουλεύει
Ο έλεγχος FISH γίνεται συνήθως με τα ίδια δείγματα όπως ο καρυότυπος - αίμα, αμνιοκύτταρα ή δείγμα χοριακών δειγμάτων. Μια δοκιμή FISH γίνεται με τη χρήση ενός καθετήρα φθορισμού που δεσμεύεται με ορισμένα συγκεκριμένα χρωμοσώματα. Αυτοί οι φθορίζοντες ανιχνευτές κατασκευάζονται από ϋΝΑ ειδικό για ορισμένα χρωμοσώματα και επισημαίνονται με φθορίζουσα βαφή. Τα κύτταρα που χρησιμοποιούνται στην ανάλυση FISH δεν χρειάζεται να καλλιεργηθούν ή να καλλιεργηθούν (η οποία μπορεί να διαρκέσει 7 έως 10 ημέρες), έτσι τα αποτελέσματα μιας ανάλυσης FISH είναι διαθέσιμα πολύ γρηγορότερα από τα αποτελέσματα ενός καρυότυπου.
Τυπικά, λαμβάνεται ένα δείγμα και αποστέλλεται στο εργαστήριο και τα χρωμοσώματα απομονώνονται σε μια ολίσθηση. Οι ανιχνευτές τοποθετούνται στη διαφάνεια και αφήνονται να υβριδοποιηθούν (ή να βρουν τον αγώνα τους) για περίπου 12 ώρες. Επειδή οι ανιχνευτές είναι κατασκευασμένοι από DNA, θα δεσμεύονται με το "ταιριαστό" DNA του συγκεκριμένου χρωμοσώματος τους. Για παράδειγμα, ένας ανιχνευτής κατασκευασμένος από DNA ειδικό για το χρωμόσωμα 21 θα δεσμεύεται με οποιοδήποτε χρωμόσωμα αριθμού 21 που υπάρχει.
Μετά από υβριδισμό (ή κολλήσει), η ολίσθηση εξετάζεται κάτω από ένα ειδικό μικροσκόπιο που μπορεί να δει φθορίζουσες εικόνες. Με τον υπολογισμό του αριθμού των φθοριζόντων σημάτων, ένας κυτταρογενετικός μπορεί να καθορίσει πόσα από ένα συγκεκριμένο χρωμόσωμα είναι παρόντα. Για παράδειγμα, ένα άτομο χωρίς σύνδρομο Down θα έχει δύο φθορίζοντα σήματα που αντιστοιχούν στα δύο χρωμοσώματα του αριθμού 21 .
Ένα άτομο με τρισωμία 21 θα έχει τρία φθορίζοντα σήματα που αντιστοιχούν στα τρία χρωμοσώματα του αριθμού 21. Τυπικά, οι κυτταρογενετικοί θα χρησιμοποιήσουν ανιχνευτές για τα χρωμοσώματα 13, 18, 21, Χ και Υ. Αυτά είναι τα χρωμοσώματα που μπορούν να οδηγήσουν σε τρισωμίες για τον άνθρωπο.
Διάγνωση σύνδρομου Down
Αν και δεν εξετάζει την πραγματική δομή των χρωμοσωμάτων που αναλύθηκαν, η ανάλυση FISH μπορεί να σας πει πόσα αντίγραφα ενός συγκεκριμένου χρωμοσώματος είναι παρόντα. Στο σύνδρομο Down, ο κυτταρογενετικός χρησιμοποιεί ανιχνευτές για το χρωμόσωμα αριθ. 21. Αν υπάρχουν τρία φθορίζοντα σήματα κάτω από το μικροσκόπιο, τότε γίνεται η διάγνωση του συνδρόμου Down.
Πώς η δοκιμή FISH διαφέρει από έναν καρυότυπο;
Η ανάλυση FISH σας δείχνει μόνο ότι υπάρχουν ορισμένα χρωμοσώματα και πόσοι είναι παρόντες. Για παράδειγμα, μια τυπική ανάλυση FISH θα σας πει πόσα χρωμοσώματα 13, 18, 21, Χ και Υ υπάρχουν σε ένα δείγμα αμνιακού υγρού. Η ανάλυση FISH δεν θα σας δώσει πληροφορίες για κάθε χρωμόσωμα ούτε θα σας δώσει πληροφορίες σχετικά με την πραγματική δομή των χρωμοσωμάτων.
Πλεονεκτήματα
Το κύριο πλεονέκτημα της ανάλυσης FISH είναι ότι μπορεί να παρέχει γρήγορα πληροφορίες για ορισμένα χρωμοσώματα. Για παράδειγμα, σε τρεις με τέσσερις ημέρες, μπορεί να πει πόσα αντίγραφα ενός χρωμοσώματος αριθ. 21 μπορεί να έχει ένα συγκεκριμένο άτομο.
Αντίθετα, ένας παραδοσιακός καρυότυπος μπορεί να διαρκέσει έως δύο εβδομάδες.
Μειονεκτήματα
Το κύριο μειονέκτημα της ανάλυσης FISH σε σύγκριση με το καρυοτυπικό είναι ότι η ανάλυση FISH σας δίνει λιγότερες πληροφορίες για όλα τα χρωμοσώματα που μελετήθηκαν. Για παράδειγμα, μια τυπική προγεννητική δοκιμή FISH θα σας πει πόσα χρωμοσώματα 13, 18, 21, Χ και Υ υπάρχουν (δηλ. Αν υπάρχουν δύο αντίγραφα ή τρία) αλλά δεν θα σας δώσουν καμία πληροφορία σχετικά με κάποιο από τα άλλα χρωμοσώματα ή οποιαδήποτε πληροφορία σχετικά με την πραγματική δομή των χρωμοσωμάτων.
Τι να ζητήσετε από το γιατρό σας
- Χρησιμοποιεί το εργαστήριο που χρησιμοποιείτε δοκιμή FISH;
- Η ασφάλισή μου καλύπτει το κόστος των δοκιμών FISH;
- Πόσο αξιόπιστος είναι ο έλεγχος FISH για το σύνδρομο Down;
- Πόσο καιρό θα πάρει για να πάρει αποτελέσματα FISH (από amnio μου ή CVS);
- Το εργαστήριο κάνει επίσης ένα πλήρες καρυότυπο;
- Πόσο καιρό χρειάζεται για να πάρετε τα αποτελέσματα του καρυότυπου;
Συμπέρασμα
Η ανάλυση FISH έχει το πλεονέκτημα της παροχής ταχείας αλλά περιορισμένης πληροφόρησης σχετικά με τα χρωμοσώματα ενός εμβρύου. Είναι πολύ καλό να απαντήσετε στην ερώτηση - «Το μωρό μου έχει τριψία 21;» αλλά παρέχει περιορισμένες πληροφορίες για άλλες δομικές ανωμαλίες χρωμοσωμάτων όπως μετατοπίσεις και διαγραφές.
Πηγές
Αμερικανικό Κολέγιο Μαιευτήρων και Γυναικολόγων (ACOG). Έλεγχος ανωμαλιών χρωμοσωμάτων εμβρύου. Δελτίο πρακτικής ACOG, αριθμός 77, Ιανουάριος 2007.
Εθνικό Ινστιτούτο Ανθρώπινου Γονιδιώματος Υβριδοποίηση σε κατάσταση φθορισμού (FISH), 2008.