Φθορισμός σε κατάσταση υβριδισμού
Η υβριδοποίηση ίη situ φθορισμού (FISH) είναι μία από τις διάφορες τεχνικές που χρησιμοποιούνται για την αναζήτηση του DNA των κυττάρων σας, αναζητώντας την παρουσία ή την απουσία συγκεκριμένων γονιδίων ή τμημάτων γονιδίων.
Πολλοί διαφορετικοί τύποι καρκίνου συνδέονται με γνωστές γενετικές ανωμαλίες. Και με τη γενετική, δεν μιλάμε μόνο για κληρονομικότητα. Κατά τη διάρκεια μιας ζωής, τα κύτταρα μπορούν να κάνουν λάθη όταν διαιρούνται και αναπτύσσονται.
Οι μεταλλάξεις στο DNA που σχετίζονται με τον καρκίνο μπορεί να συσσωρευτούν σε αυτά τα κύτταρα.
Πώς λειτουργεί το ψάρι;
Το FISH είναι μια τεχνική που χρησιμοποιεί ανιχνευτές φθορισμού για την ανίχνευση συγκεκριμένων γονιδίων ή τμημάτων γονιδίων (ακολουθίες DNA). Το προσωπικό του ιατρικού κέντρου και οι ογκολόγοι χρησιμοποιούν το FISH για να βοηθήσουν στην αξιολόγηση των ασθενών που μπορεί να έχουν καρκίνο και μερικές φορές να παρακολουθούν έναν ασθενή που έχει ήδη διαγνωστεί με καρκίνο και έχει υποβληθεί σε θεραπεία.
Το FISH μπορεί να γίνει χρησιμοποιώντας διάφορους τύπους δειγμάτων ανάλογα με την τοποθεσία και τον τύπο του υποψία καρκίνου: Τα κύτταρα όγκου που λαμβάνονται από το περιφερικό αίμα, από βιοψία μυελού των οστών ή από βιοψία λεμφαδένων και σταθεροποιημένο με φορμαλίνη ιστό παραφίνης (αυτό αναφέρεται ένα δείγμα ιστού που επεξεργάζεται στο εργαστήριο και ενσωματώνεται σε έναν τύπο κηρού, καθιστώντας τον πιο άκαμπτο, έτσι ώστε να μπορεί να τεμαχιστεί σε λεπτά τμήματα και να τοποθετηθεί για θέαση κάτω από το μικροσκόπιο).
Τι σημαίνουν τα γράμματα;
Το "Η" στο FISH αναφέρεται σε υβριδισμό.
Στον μοριακό υβριδισμό χρησιμοποιείται μια σημασμένη ακολουθία ϋΝΑ ή RNA ως ανιχνευτής - απεικονίστε ένα κόκκινο τούβλο Lego, αν θέλετε. Ο ανιχνευτής χρησιμοποιείται για να βρει ένα αντίστοιχο τούβλο Lego, ή ακολουθία DNA, σε ένα βιολογικό δείγμα.
Το DNA στο δείγμα σας είναι σαν σωρούς από τούβλα Lego και τα περισσότερα τούβλα σε αυτούς τους σωρούς δεν θα ταιριάζουν με τον κόκκινο καθετήρα μας.
Και όλα τα τούβλα σας είναι τακτοποιημένα σε 23 ζεύγη σωρού από τούβλα - κάθε σωρός είναι ένα από τα ζευγαρωμένα ομόλογά σας χρωμοσώματα, περισσότερο ή λιγότερο. Σε αντίθεση με τα τούβλα Lego, ο κόκκινος ανιχνευτής Lego είναι σαν ένας ισχυρός μαγνήτης και βρίσκει τον αγώνα χωρίς να χρειάζεται να ταξινομεί τους σωρούς.
Το "F" αναφέρεται σε φθορισμό. Ο κόκκινος ανιχνευτής μας μπορεί να χαθεί στους σωρούς τούβλων, επομένως είναι ετικετοποιημένος με έγχρωμη φθορίζουσα βαφή έτσι ώστε να ανάβει. Όταν εντοπίσει την αντιστοίχιση μεταξύ των 23 ζευγαρωμένων πασσάλων, μια ετικέτα φθορισμού αποκαλύπτει την τοποθεσία της. Έτσι, μπορείτε τώρα να δείτε πώς οι ερευνητές και οι κλινικοί γιατροί θα μπορούσαν να χρησιμοποιήσουν το FISH για να βοηθήσουν να εντοπίσουν πού (ποιο σωρό, ή ποιο χρωμόσωμα) βρίσκεται ένα συγκεκριμένο γονίδιο για ένα συγκεκριμένο άτομο.
Το "I" και το "S" ισχύουν επί τόπου . Αυτό αναφέρεται στο γεγονός ότι το κόκκινο τούβλο του Lego ψάχνει για τον αγώνα του στο δείγμα που δώσατε .
Τι είναι οι συγκεκριμένοι καρκίνοι του αίματος;
Οι μέθοδοι FISH και άλλες in situ υβριδοποιήσεις χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση μιας ποικιλίας χρωμοσωμικών ανωμαλιών - αλλαγών στο γενετικό υλικό, αλλαγές στα χρωμοσώματα, συμπεριλαμβανομένων των εξής:
Διαγραφή - μέρος του χρωμοσώματος έχει φύγει
Μετατόπιση - μέρος ενός χρωμοσώματος αποκόπτεται και κολλά σε ένα άλλο χρωμόσωμα
Αναστροφή - μέρος του χρωμοσώματος ξεσπά και επανέρχεται ξανά, αλλά με αντίστροφη σειρά
Διπλασιασμός - μέρος ενός χρωμοσώματος υπάρχει σε πάρα πολλά αντίγραφα μέσα στο κελί
Κάθε τύπος καρκίνου μπορεί να έχει το δικό του σύνολο χρωμοσωμικών αλλαγών και σχετικούς ανιχνευτές. Το FISH όχι μόνο συμβάλλει στον εντοπισμό των αρχικών γενετικών αλλαγών σε μια ασθένεια όπως ο καρκίνος, αλλά μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για την παρακολούθηση της αντίδρασης στη θεραπεία και την ύφεση της νόσου.
Οι γενετικές αλλαγές που εντοπίζονται από το FISH παρέχουν μερικές φορές πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με τον τρόπο συμπεριφοράς του καρκίνου ενός ατόμου, με βάση όσα έχουν παρατηρηθεί στο παρελθόν σε άτομα με τον ίδιο τύπο καρκίνου και παρόμοιες γενετικές αλλαγές. Μερικές φορές χρησιμοποιείται το FISH μετά τη διάγνωση, για να συλλέξει πρόσθετες πληροφορίες που μπορεί να βοηθήσουν στην πρόβλεψη του αποτελέσματος του ασθενούς ή της καλύτερης θεραπείας.
Το FISH μπορεί να αναγνωρίσει χρωμοσωμικές ανωμαλίες στις λευχαιμίες , συμπεριλαμβανομένης της χρόνιας λεμφοκυτταρικής λευχαιμίας (CLL). Για χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία / μικρό λεμφοκυτταρικό λέμφωμα, το FISH επιτρέπει στους ασθενείς να ανακαλύψουν την προγνωστική τους κατηγορία: καλή, ενδιάμεση ή κακή. Στην οξεία λεμφοβλαστική λευχαιμία (ALL), η γενετική των λευχαιμικών κυττάρων μπορεί να σας πει για το επίπεδο κινδύνου του καρκίνου και να βοηθήσει να καθοδηγήσει τις θεραπευτικές αποφάσεις.
Οι πίνακες FISH είναι επίσης διαθέσιμοι για λέμφωμα, πολλαπλό μυέλωμα, πολλαπλασιαστικές διαταραχές κυττάρων πλάσματος και μυελοδυσπλαστικό σύνδρομο. Στην περίπτωση λέμφωμα κυττάρων μανδύα, για παράδειγμα, υπάρχει μια μετατόπιση που μπορεί να εντοπίσει το FISH που ονομάζεται GH / CCND1 t (11; 14) που συσχετίζεται συχνά με αυτό το λέμφωμα.
Γιατί FISH;
Ένα πλεονέκτημα του FISH είναι ότι δεν χρειάζεται να εκτελείται σε κύτταρα που διαχωρίζονται ενεργά. Η κυτταρογενετική εξέταση συνήθως διαρκεί περίπου τρεις εβδομάδες, επειδή τα καρκινικά κύτταρα πρέπει να αναπτύσσονται σε εργαστηριακά πιάτα για περίπου 2 εβδομάδες πριν να μπορούν να εξεταστούν. Αντίθετα, τα αποτελέσματα FISH είναι συνήθως διαθέσιμα από το εργαστήριο εντός μερικών ημερών.
> Πηγές:
> Κυτταρογενετικοί έλεγχοι του Καρκίνου CPT.
> Υβριδισμός φθορισμού εν στάσει (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Υβριδισμός φθορισμού εν στάσει (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg Α, Cooley LD, et αϊ. Καθοδήγηση για τη δοκιμή υβριδοποίησης σε συνθήκες φθορισμού σε αιματολογικές διαταραχές. Το Περιοδικό Μοριακής Διαγνωστικής: JMD. 2007 · 9 (2): 134-143.