Πώς λειτουργεί η δοκιμασία HIV Blot Western;

Η Διαδικασία Ελέγχου HIV

Ο έλεγχος του HIV είναι συνήθως μια διαδικασία πολλαπλών βημάτων. Η πρώτη δοκιμή που χρησιμοποιείται είναι γενικά μια δοκιμή υψηλής ευαισθησίας . Οι δοκιμές υψηλής ευαισθησίας έχουν σχεδιαστεί για την ανίχνευση όσο το δυνατόν περισσότερων πιθανών λοιμώξεων από τον ιό HIV . Αυτός ο πρώτος έλεγχος στη συνέχεια ακολουθείται από μία ή περισσότερες εξαιρετικά συγκεκριμένες δοκιμές για να αποκλειστεί η πιθανότητα ψευδώς θετικών διαγνώσεων HIV. Ιστορικά, η πιο συνηθισμένη από τις εξαιρετικά συγκεκριμένες δοκιμές που χρησιμοποιούνται στις επιβεβαιωτικές εξετάσεις είναι η δοκιμασία Western Blot.

Ωστόσο, υπάρχουν και άλλες δοκιμές επιβεβαίωσης που μπορούν να χρησιμοποιηθούν επίσης.

Πώς λειτουργεί το τεστ κηλίδας Western;

Οι δοκιμασίες κηλίδας Western είναι επίσης γνωστές ως ανοσοσφαιρίνες πρωτεΐνης. Αυτές οι δοκιμές χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε ένα δείγμα. Η βασική τεχνική ενός στυπώματος Western περιλαμβάνει τη διαλογή πρωτεϊνών κατά μήκος σε μια γέλη. Στη συνέχεια, το πλέγμα αυτό ανιχνεύεται με αντισώματα που αντιδρούν στις συγκεκριμένες πρωτεΐνες που αναζητούνται.

Ωστόσο, όταν χρησιμοποιούνται κηλίδες Western για δοκιμές HIV , αυτή η διαδικασία εκτελείται στην πραγματικότητα αντίστροφα. Κανονικά, σε μια δοκιμασία στυπώματος Western, αναζητούνται άγνωστες πρωτεΐνες με γνωστά αντισώματα . Ωστόσο, για μια δοκιμασία στυπώματος Western HIV, οι επιστήμονες εργάζονται με προετοιμασμένα δείγματα πρωτεϊνών του HIV και εξετάζουν αν υπάρχουν αντισώματα στο αίμα ενός ατόμου που να τους κολλάει.

Οι εξετάσεις HIV με στύπωμα Western εξετάζουν συνήθως αντισώματα κατά των ακόλουθων πρωτεϊνών του HIV:

Προκειμένου να θεωρηθεί ότι ένα άτομο είναι θετικό για τον ιό, πρέπει να έχει είτε αντισώματα κατά μιας από τις πρωτεΐνες φακέλου και μία από τις βασικές πρωτεΐνες, είτε εναντίον ενός από τα ένζυμα.

Εάν ένα άτομο έχει αντισώματα που είναι εναντίον ενός διαφορετικού συνδυασμού πρωτεϊνών, τα αποτελέσματά τους θεωρούνται συνήθως απροσδιόριστα. Ο ακριβής αλγόριθμος για τον προσδιορισμό ενός απροσδιόριστου αποτελέσματος ποικίλει για κάθε συγκεκριμένο τεστ στύπωσης Western. Ωστόσο, ο στόχος είναι πάντα να μειωθεί ο κίνδυνος μιας ψευδώς θετικής εξέτασης που ανατρέπει κάποιον χωρίς λόγο.

Απροσδιόριστα αποτελέσματα Western blot μπορεί να είναι ένα σημάδι μιας νέας λοίμωξης από HIV . Αυτά τα αποτελέσματα των δοκιμών μπορούν επίσης να εμφανιστούν όταν τα άτομα έχουν εκτεθεί ή έχουν μολυνθεί με άλλους ρετροϊούς , όπως το HTLV . Σε γενικές γραμμές, εάν ένα άτομο με απροσδιόριστο τεστ του HIV με κηλίδες κατά του HIV είναι πραγματικά θετικό για τον ιό HIV, η δοκιμή κηλίδας Western θα γίνει σαφώς θετική μετά την πάροδο περισσότερου χρόνου.

Οι δοκιμασίες κηλίδας Western χρησιμοποιούνται ως επιβεβαιωτικές δοκιμές και όχι ως πρωταρχικές δοκιμές, επειδή είναι λιγότερο ευαίσθητες από τις πρώτες δοκιμές ELISA ή τις δοκιμές ανίχνευσης RNA . Αυτό σημαίνει ότι είναι λιγότερο πιθανό να ανιχνεύσουν μια μόλυνση. Ωστόσο, οι δοκιμασίες κηλίδας Western είναι επίσης λιγότερο πιθανό να δώσουν ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα δοκιμής όταν χρησιμοποιούνται για να επιβεβαιώσουν μια αρχική θετική δοκιμή.

Εάν έχετε πει ότι έχετε μια απροσδιόριστη δοκιμή Western Blot

Το γεγονός ότι ένα τεστ Western blot είναι απροσδιόριστο μπορεί να είναι εξαιρετικά αγχωτικό για άτομα που υποβάλλονται σε δοκιμές HIV.

Υπάρχουν διάφοροι λόγοι που δεν σχετίζονται με την έκθεση του ιού HIV που μπορεί να προκαλέσει ένα τέτοιο αποτέλεσμα. Ωστόσο, οι άνθρωποι με απροσδιόριστα στυπώματα Western συνηθίζουν να αναζητούν επαναλαμβανόμενες δοκιμές, είτε αμέσως είτε μετά από κάποιο χρονικό διάστημα.

Ο άμεσος επανελεγχόμενος έλεγχος για να διαπιστωθεί εάν υπήρξε κάποιο ελάττωμα στον τρόπο εκτέλεσης του κηλιδώματος Western. Αντίθετα, η αναμονή ενός μήνα ή περισσότερο πριν από την επανεξέταση επιτρέπει στον ανοσοποιητικό σύστημα ενός ατόμου να παράγει επιπρόσθετα αντισώματα κατά των αντιγόνων του HIV, εάν έχουν μολυνθεί από τον ιό HIV.

Η επανεξέταση συχνά θα επιλύσει μια απροσδιόριστη δοκιμασία Western blot σε ένα σαφώς θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα .

Ωστόσο, εάν οι επαναλαμβανόμενες εξετάσεις συνεχίζουν να στείλουν σήματα που προκαλούν σύγχυση, οι γιατροί ίσως χρειαστεί να στραφούν σε άλλες μεθόδους για να καθορίσουν εάν έχετε ή όχι HIV λοίμωξη. Καμία δοκιμή HIV δεν είναι ιδανική σε κάθε περίπτωση.

Πηγές:

Guan M. Συχνότητα, αιτίες και νέες προκλήσεις απροσδιόριστων αποτελεσμάτων σε επιβεβαιωτικές δοκιμές Western blot για αντισώματα στον ιό της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας. Clin Vaccine Immunol. 2007 Jun · 14 (6): 649-59.

> Huang J, Wang Μ, Huang C, Liang Β, Jiang J, Ning C, Zang Ν, Chen Η, Liu J, Chen R, Liao Υ, Ye L, Liang Η. της πρόσφατης μόλυνσης από τον ιό HIV-1: μια υποσχόμενη προσέγγιση επιτήρησης του HIV-1 για περιοχές περιορισμένης χρήσης πόρων. Biomed Res Int. 2018 Ιαν 14, 2018: 4390318. doi: 10.1155 / 2018/4390318.

> Kong W, Li Y, Cheng S, Yan C, An S, Dong Z, Yan L, Yuan Y. Το Luminex xMAP σε συνδυασμό με το Western blot βελτιώνει την διαγνωστική ευαισθησία του ιού HIV. J Virol Methods. 2016 Ιαν. 227: 1-5. doi: 10.1016 / j.jviromet.2015.10.007.

> Pandori MW, Westheimer Ε, Gay J, Hossow-Weidman LB, Craw J, Hall L, Giancotti FR, Mak ML, Madayag C, Tsoi Β, Louie Β, Patel Ρ, Owen SM, Peters PJ . Η δοκιμασία διαφοροποίησης του πολλαπλού εμβολίου HIV-1 / HIV-2 είναι συγκρίσιμη με την κηλίδα Western και μια δοκιμασία ανοσοφθορισμού κατά την επιβεβαίωση της λοίμωξης από HIV σε μια προοπτική μελέτη σε τρεις περιοχές των Ηνωμένων Πολιτειών. J Clin Virol. Δεκέμβριος 2013, 58 Suppl 1: e92-6. doi: 10.1016 / j.jcv.2013.10.006.